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染色液的具體染色步驟分享
更新時(shí)間:2022-04-26 點(diǎn)擊次數:1041次
染色液適用于各種細胞、組織石蠟切片、冰凍切片、火膠棉切片、樹(shù)脂切片、涂片、印片的染色,用于臨床病理學(xué)輔助診斷。
染色液的檢驗原理:
細胞中的細胞核由帶負電荷的酸性物質(zhì)組成,與帶正電荷的堿性染料蘇木素的氧化物三氧化蘇木紅有較強的親和力;而細胞漿則相反,因含有帶正電荷的堿性物質(zhì)而與帶負電的酸性染料曙紅Y的親和力較強;細胞或組織切片經(jīng)HE染色后,細胞核被染成藍紫色,細胞漿、紅細胞、肌纖維、膠原纖維、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色、粉紅色或橙紅色,與藍色的細胞核形成鮮明的對比,因此更易于觀(guān)察細胞或組織中正常成份和病變成份的一般形態(tài)結構。
染色液的儲存條件及有效期:
常溫密封避光保存,用后蓋緊瓶蓋以防染色液揮發(fā),有效期為一年。
染色液的適用儀器:
光學(xué)顯微鏡
染色液的樣本要求:
細胞涂片或組織切片應均勻,厚度適中,并充分固定。石蠟切片必須充分脫蠟。
染色液的染色步驟:
1、石蠟切片置于二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各5~10min;
2、95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各1~2min;
3、自來(lái)水浸泡或沖洗2min;
4、蘇木素染色液染5min,自來(lái)水沖洗去掉多余的染色液;
5、0.25%鹽酸酒精速過(guò)分化,迅速用自來(lái)水沖洗;
6、飽和Li2CO3返藍30s,自來(lái)水沖洗;或自來(lái)水沖洗(或浸泡)10min返藍;
7、95%乙醇脫水兩次,共1min;
8、伊紅染色液染5~10s;
9、95%乙醇分色兩次,各10~30s;
10、無(wú)水乙醇脫水兩次,共5min;
11、浸入二甲苯或二甲苯替代物中透明兩次,各5min;
12、滴一滴中性樹(shù)膠,蓋上蓋玻片封片;
13、光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。
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