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北京華科盛精細化工產(chǎn)品貿易有限公司
聯(lián)系人:李躍
手機:13683659548
電話(huà):010-64112272,-010-64112273
傳真:86-010-64112273
地址:北京朝陽(yáng)區北苑路172號歐陸大廈
郵編:100101
網(wǎng)址:www.v7780.com
郵箱:13683659548@163.com
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使用染色液前需清楚其的操作方法及注意事項
更新時(shí)間:2018-08-29 點(diǎn)擊次數:3006次
染色液溶于水,微溶于乙醇。水溶液顯酸性。在實(shí)驗室,草酸銨可以和溶液中的鈣、鎂等離子生成沉淀,用過(guò)濾的方法除去溶液中的鈣、鎂離子。染色液用于免疫組化染色,應用在Dako 自動(dòng)染色系統上。
染色液的使用方法:
1.顯色液配制
10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時(shí)加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用
2. 顯色
準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過(guò)氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。
3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿(mǎn)整個(gè)固相膜表面(可按比例增減)。
4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現。
5.用鑷子夾起固相膜,放進(jìn)無(wú)離子水里清洗。
6.空氣中晾干。
7. 拍照記錄 。
染色液的注意:
1. 溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶*溶解再行使用;
2. 顯色工作液應現用現配,新鮮配制的工作液應為無(wú)色或淺棕色,如顏色過(guò)深,請勿使用;
3. DAB在常溫下不穩定,每次取用后均應及時(shí)加蓋密封放回冰箱,以免因DAB分解影響實(shí)驗,或因滲漏造成實(shí)驗環(huán)境污染;
4. DAB有潛在致突變作用,操作時(shí)應注意穿戴好防護用具。
染色液的使用方法:
1.顯色液配制
10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,顯色時(shí)加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用
2. 顯色
準備好含有待測蛋白的固相膜:包括電泳、轉印、封阻、一抗(或生物素)處理、辣根過(guò)氧化酶(HRP)標記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。
3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿(mǎn)整個(gè)固相膜表面(可按比例增減)。
4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現。
5.用鑷子夾起固相膜,放進(jìn)無(wú)離子水里清洗。
6.空氣中晾干。
7. 拍照記錄 。
染色液的注意:
1. 溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶*溶解再行使用;
2. 顯色工作液應現用現配,新鮮配制的工作液應為無(wú)色或淺棕色,如顏色過(guò)深,請勿使用;
3. DAB在常溫下不穩定,每次取用后均應及時(shí)加蓋密封放回冰箱,以免因DAB分解影響實(shí)驗,或因滲漏造成實(shí)驗環(huán)境污染;
4. DAB有潛在致突變作用,操作時(shí)應注意穿戴好防護用具。
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