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染色液的濃度如何測定
更新時(shí)間:2019-04-24 點(diǎn)擊次數:3464次
染色液主要用途:哺乳動(dòng)物腦組織的缺血梗塞染色,測定腦梗死灶體積
染色液濃度的測定
A、用肉眼比較見(jiàn)車(chē)染料濃度:
將一用于對照的標準液與另一用過(guò)的染色液按相同比例稀釋后,用肉眼檢查法給予鑒定,再用兩種溶液之體積計算出染色液之濃度差別。
B、分光光度法測定染料濃度:使用分光光度計。
將染色液之樣液稀釋后測定其吸光值,再取具有標準染料濃度之對照液以同樣比例稀釋后測定其吸光值,然后比較這兩個(gè)吸光值,再計算出生產(chǎn)用之染色液的實(shí)際染料濃度。
染料濃度計算方法(克/公升)=吸光值*染料系數*稀釋倍數
C、 定期部分更新染色液以調整染色力的方法:
定期的部分更新染色液也可以延長(cháng)染色液的使用壽命,做法是在一定間隔的時(shí)間后將一定量的槽液排放掉,并換入新液,計算新液時(shí)應包括流出時(shí)帶走的染料量,這樣便定期的消除了部分雜質(zhì),染色液可以在較長(cháng)時(shí)間內保持穩定生產(chǎn)均勻的著(zhù)色膜。
染色液的原理:
2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)是脂溶性光敏感復合物,常用于檢測種子的生存能力以及檢測哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶系統的質(zhì)子受體,能與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色。
正常腦組織和有活力種子胚組織活細胞中的脫氫酶可以將 TTC 還原成不溶性的紅色穩定的三苯基甲臢(TTF),如果腦組織細胞或胚種細胞死亡或生活力衰退,則不能染色或染色較淺。
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